Farm Wright J, Farm Muguerza A, Farm Querini C, Farm Pistaccio L, Farm Gnius A Servicio de Farmacia. H.I.A.E.P. “Sor María Ludovica”. La Plata. Buenos Aires. Argentina.

RESUMEN

Introducción: Enoxaparina sódica es un agente antitrombótico utilizado en pediatría para la profilaxis de la trombosis venosa profunda. En la actualidad las formulaciones comerciales disponibles son jeringas prellenadas sin conservantes de 20mg/0.2ml, 40mg/0.4ml, 60mg/0.6ml y 80mg/0.8ml en dosis no adecuadas para la pediatría. Desde la Unidad Mezclas Estériles (UME) del Servicio de Farmacia planteamos que la dilución de las formulaciones comerciales constituiría una solución rápida al problema aunque la estabilidad de la enoxaparina diluida no ha sido ampliamente evaluada.

Objetivo: Determinar la estabilidad y esterilidad de tres concentraciones diferentes de enoxaparina diluida.

Materiales y métodos: Se prepararon 48 muestras, contenidas en jeringas de tu-berculina, de enoxaparina sin conservantes, diluida con cloruro de sodio 0.9% a tres concentraciones diferentes: 2000, 2667 y 4000 UAXa/ml. Se evaluó la estabilidad de las muestras en base a la reducción del potencial anticoagulante en el tiempo. Las determinaciones se realizaron a las 48, 96 hs, 7 y 10 días luego de preparar las jeringas. Las muestras se conservaron entre 2-8²C sin fotoprotec-clón hasta el momento del análisis. Cada muestra se analizó por duplicado. Por su parte, la esterilidad de la dilución se evaluó mediante cultivo en agar sangre durante 3 días a 37²C.

Resultados: Se expresan los valores obtenidos como porcentaje del valor teórico esperado. De las 24 muestras analizadas, la totalidad de las mismas demostró retener más del 90 % de la actividad an-tl-factor Xa, bajo las condiciones ensayadas, a excepción de la muestra correspondiente a 2667 UAXa/ml evaluada a las 48 hs del 2do ensayo, donde se cometió un error de dilución, quedando descartados estos valores.No se obtuvo desarrollo en los cultivos realizados. Conclusiones: La enoxaparina diluida

bajo condiciones asépticas en la UME, demostró ser estable durante por lo menos 10 días y estéril, constituyendo esta estrategia una herramienta de gran utilidad para suplir las deficiencias del mercado farmacéutico y optimizar el tratamiento de los pacientes neonatos y pediátricos.

Stability and sterility assessment of di-luted enoxaparin for use in pediatrics

Farm Wright J, Farm Muguerza A, Farm Querini C, Farm Pistaccio L, Farm Gnius A Servicio de Farmacia. H.I.A.E.P. “Sor María Ludovica”. La Plata. Buenos Aires. Argentina.

ABSTRACT

Introduction

Enoxaparin sodium ¡s an antithrombotic agent used ¡n pediatrics for the prophylaxis of deep vein thrombosis (DVT). Current-ly, the available commercial formulas are preservative-free prefilled syringes with 20mg/0.2ml, 40mg/0.4ml, 60mg/0.6ml

and 80mg/0.8ml ¡n doses not suitable for use ¡n pediatrics. The Sterile Compounding Unit of the Pharmacy Department proposes the dilution of commercial formulas, whlch would serve as a qulck solutlon to the problem, although the stability of dlluted enoxaparin has not been broadly assessed.

Objective

To determine the stability and sterility of 3 dlfferent concentratlons of dlluted enoxaparin.

Materials and methods. Forty-eight sam-ples of preservative-free enoxaparin dlluted wlth 0.9% sodium chloride to 3 d¡-fferent concentrations were prepared in tuberculin syringes: 2000, 2667 and 4000 UAXa/ml. Together with the Hematology Department, the stability of the samples was evaluated based on the reduction of anticoagulant potential over time. Such as-sessments were performed 48 hs, 96 hs, 7 days and 10 days after syringe preparation. The samples were kept between 2-8²C without photoprotection until the time of analysls. Each sample was analyzed ¡n duplícate. Llkewlse, the sterility of the dilution was evaluated, in cooperation with Central Laboratory, with blood agar during 3 days at 37²C.

Results

The valúes obtained are expressed as a percentage of the theoretical expected valué. All 24 samples analyzed proved to keep over 90% of anti-factor Xa activity under the conditions tested, except from the 2667 UAXa/ml sample analyzed after 48 hs of the second assay, where a dilution error was made, for whlch such valúes were dlsregarded. No growth was obtal-ned ¡n cultlvatlons.

Conclusions

Dlluted enoxaparin, under aseptic conditions at the Sterile Compounding Unit, proved to be stable during at least 10 days and sterile, belng a strateglc and useful tool to complete the deflclencles of the farma-ceutlcals market and to optlmlze the treat-ment of neonate and pedlatrlc patlents.

Introducción: La enoxaparina sódica es un agente antitrombótico utilizado en pediatría para la profilaxis de la trombosis venosa profunda (TVP). Las dosis recomendadas se basan en el peso del paciente, pero la falta de una formulación pediátrica hace que la seguridad, reproducibilidad y dosificación ajustada al peso del paciente se dificulte con las presentaciones disponibles. En la actualidad las especialidades comerciales son jeringas prellenadas sin conservantes de 20mg/0.2ml, 40mg/0.4ml, 60mg/0.6ml y 80mg/0.8ml. La potencial consecuencia de errores de dosificación se agudiza debido a la vida media larga de la enoxaparina y la falta de un agente adecuado para reversión en caso de sobredosis. Desde la Unidad Mezclas Estériles (U.M.E.) del Servicio de Farmacia planteamos que la dilución de las formulaciones comerciales constituiría una solución rápida al problema aunque la estabilidad de la enoxaparina diluida no ha sido suficientemente evaluada. La preparación diaria de las unidosis diluidas Implica una gran carga laboral y un posible desperdicio del fármaco, como así también obliga al paciente ambulatorio a acudir frecuentemente al hospital a retirar su medicación. Objetivo: Determinar la estabilidad y esterilidad de tres concentraciones diferentes de enoxaparina diluida en solución fisiológica.

Materiales y métodos. En la U.M.E, bajo cabina de flujo laminar, se prepararon, utilizando técnica aséptica, 48 muestras, contenidas en jeringas de tuberculina, de enoxaparina sin conservantes (Clexa-ne^R de Sanofl Aventls Pty Ltd, Macquarle Park, NSW, Australia) diluida con cloruro de sodio 0.9% a tres concentraciones diferentes: 2000, 2667 y 4000 UAXa/ml.

En conjunto con el servicio de Hematología, se fijó una fecha de medición y en función de ésta se elaboraron las muestras 10 días, 7 días, 96hs y 48hs antes de la misma.

Para la concentración 4000 UAXA/ml: se tomó una jeringa de Clexane^R 4000 UA-XA/0.4ml y se llevó a volumen final Iml con solución fisiológica en jeringa de tuberculina Para la concentración 2667 UAXA/ml se tomó una jeringa de Clexane^R 4000 UAXA/0.4ml y se llevó a volumen final 1.5ml con solución fisiológica en jeringa de tuberculina Para la concentración 2000 UAXA/ml se tomó una jeringa de Clexane^R 4000UAXA/04ml y se llevó a volumen final 2ml con solución fisiológica en jeringa de tuberculina

Cada procedimiento se realizó por duplicado. Las muestras se conservaron refrigeradas, entre 2-8²C sin fotoprotección hasta el momento del análisis. En el Servicio de Hematología, se midió la actividad de las muestras en base a la reducción del potencial antlcoagulante en el tiempo, utilizando el ensayo cromogénlco Hemos IL® para determinar la actividad anti-factor Xa. Las contramuestras quedaron almacenadas en la U.M.E. Las determinaciones se realizaron a las 48, 96 hs, 7 y 10 días luego de elaborar las jeringas.

El mismo ensayo se repitió al cabo de un mes, pero en este caso, el tiempo de 96 hs se reemplazó por 72 hs por razones operativas. Las diferentes muestras a diferentes concentraciones y tiempo de almacenamiento fueron ajustadas mediante diluciones con el fin de obtener plasmas con concentraciones de 1,25 UAXa/ml, tomando este valor como valor teórico. Cada muestra se analizó por duplicado. En forma complementaria, la esterilidad de las diluciones se evaluó, con la colaboración del Laboratorio Central del Hospital, mediante el cultivo en agar sangre durante 3 días a 37²C.

Resultados. En Tabla 1 se muestran los valores obtenidos expresados como porcentaje del valor teórico esperado, habiéndose realizado el promedio previamente de los valores por duplicado obtenidos para cada concentración a cada tiempo. De las 24 muestras analizadas, la totalidad de las

mismas demostró retener más del 90 % de la actividad antl-factor Xa, bajo las condiciones ensayadas, a excepción de la muestra correspondiente a 2667 UAXa/ml evaluada a las 48 hs del 2do ensayo, donde se cometió un error de dilución, quedando descartados estos valores. Así, durante el 1er ensayo, a 2000 UAXa/ml, la actividad determinada fue de 94.88, 99.56, 97.56 y 103.80%; a 2667 UAXa/ml de 101.56, 103.00, 102.08, 103.00%; y a 4000 UAXa/ mi de 105.00, 103.56, 100.12 y 97.52%, a las 48, 96 hs, 7 y 10 días, respectivamente; mientras que durante el 2do ensayo, los valores obtenidos fueron 97.76, 106.78, 94.00 y 94.20% para 2000 UAXa/ml; 108.08, 98.40 y 95.44% para 2667 UAXa/ mi; y 100.16, 102.6, 100.44 y 95.00% para 4000 UAXa/ml, a las 48, 72hs, 7 y 10 días respectivamente. No se obtuvo crecimiento en los cultivos realizados.

segundo ensayo

Tiempo	200G U/ml 1				2667 U/ml 1				40QG U/ml 1
Tiempo			%desv 1	% desv 2			%desv 1	%desv 2			%desv 1	% desv 2
10 Dias	1,18	1,175	-7,1	-7,5	1,196	1,19	-5,4	-6	1,2	1,175	-5	-7,5
7 Dias	1,175	1,175	-7,6	-7,5	1,2	1,26	-5	1	1,306	1,205	5,6	-4,5
72 Hs	1,378	1,294	12,7	4,4	1,327	1,375	7,7	12,5	1,295	1,27	4,5	2
48 Hs	1,208	1,234	-4,3	-1,6	ERROR DILUCION LAB				1,266	1,238	1,6	-1,2

Discusión: Si bien existe un estudio en el que se evalúa la estabilidad de enoxapari-na diluida, en el mismo Jas muestras fueron diluidas en agua estéril a una única concentración mientras que en este ensayo se utilizó como diluyente solución fisiológica a tres concentraciones diferentes, adecuándose a las dosis solicitadas para nuestros pacientes neonatos y pediátricos. Si bien el ensayo de esterilidad utilizado no corresponde al descrlpto en Farmacopea Argentina Vil Ed (tioglicolato, caldo tiogli-colato alternativo, caldo digerido de Caseína-Soja), por ser esta preparación una fórmula magistral se consideró suficiente realizar control de esterilidad con los medios que se tenían a disposición, lo que aseguró las condiciones necesarias para los objetivos planteados. ^1-2

Conclusiones: La enoxaparina diluida bajo condiciones asépticas en la U.M.E., demostró ser estable durante por lo menos 10 días y estéril, constituyendo esta estrategia una herramienta de gran utilidad para suplir las deficiencias del mercado farmacéutico y optimizar el tratamiento de los pacientes neonatos y pediátricos.

Referencias

bibliográficas

7- Dager WE, Gosselin RC, King JH, Christensen CL, Owings JT, Larkin EC. Anti Xa Stability of Diluted Enoxaparin for Use in Pediatrics. Ann Pharmacother 2004;(38):569-573 2- Farmacopea Nacional Argentina.Codex Medicamenta-rius Argentino. Ministerio de Salud A.N.M.A.T.Séptima edición. Volumeni 370. Ensayos de esterilidad. Pag. 139-145

Tiempo	2000 U/ml 1				2667 U/ml 1				4000 U/ml 1
Tiempo			% desv 1	% desv 2			% desv 1	% desv 2			% desv 1	% desv 2
10 Dias	1,292	1,303	4,1	5,3	1,336	1,239	8,6	-1,1	1,265	1,233	1,5	-1,7
7 Dias	1,238	1,201	-1,3	-4,9	1,276	1,276	2,6	2,6	1,273	1,236	2,3	-1,4
96 Hs	1,265	1,224	1,4	-2,6	1,293	1,282	4,3	3,2	1,31	1,279	6	2,9
48 HS	1,204	1,168	-4,7	-8,2	1,276	1,268	2,6	1,8	1,299	1,326	4,9	7,6

Determinación de la estabilidad y esterilidad de enoxaparina diluida para sn nso en pediatría